Biophotonic

 

L’ensemble des instruments listés ci-dessous est sous la responsabilité d’un ingénieur d’études INTS – responsable d’activité et d’un technicien INTS dont les missions sont la prestation d’analyse, la formation, le conseil et l’aide au développement d’applications spécifiques en microscopie et analyses d’images.

Microscope confocal C1 (Nikon)

Crédit : J.PICOT

Equipé d’une platine chauffante ainsi que d’une enceinte thermostatée et régulée en humidité et en gaz, le microscope confocal C1 (statif Eclipse TE300) permet d’imager des éléments subcellulaires ou la migration, division et différenciation des cellules en culture sur le long terme. Il est équipé de blocks filtres permettant d’observer les fluorochromes tels que DAPI, GFP et TRITC à divers grandissements (2x/0.06 Plan ; 4x/0.13 Plan ; 10x/0.45 DIC Plan ; 20x/0.75 DIC Plan ; 40x/0.75 DIC Plan; 60x/1.4 DIC Plan APO oil ; 100x/1.3 DIC Plan APO oil). Le microscope est équipé pour l’imagerie en contraste interférentiel différentiel (DIC). Le banc laser se compose d’un laser 100mW Argon 488nm et d’un laser 4mW HeNe 543nm.

Cet instrument a été financé par l’INTS, l’Inserm et l’Université Paris Diderot.

 

Vidéomicroscope Axio-Observer Z1 (Zeiss)

Crédit : J.PICOT

Entièrement motorisé et piloté par le logiciel AxioVision (Zeiss), le vidéomicroscope Axio- Observer Z1 est équipé d’une surplatine chauffante motorisée piezo ainsi que d’une enceinte thermostatée et régulée en humidité et en gaz (CO2 et N) permettant de réaliser des time lapses long terme sous condition normoxique ou hypoxique.

Le module Definite focus permet le maintien du focus quelques soit les conditions expérimentales et environnementales. Les sources d’illumination sont composées d’un boitier HXP120 et du système Colibri (365, 470, 555, 590 et 625nm dont 4 diodes en simultané).

Les objectifs compatibles pour la fluorescence, la transmission et le contraste interférentiel différentiel (DIC) sont tous Plan APO et de forte ouverture numérique : 10x/0.45, 20x/0.8, 40x/0.95, 40x/1.3 oil, 63x/1.4 oil et 100x/1.4 oil.

Equipé de deux caméras AxioCam HSm et d’un module Dual cam, il est possible d’imager 60 images/s par couleur sans distorsion temporelle entre les deux fluorescences. Une troisième caméra AxioCam MRm plus sensible équipe le microscope entièrement piloté par un écran TFT tactile.

Cet instrument a été financé par la Région Ile-de-France (SESAME), l’INTS, l’Inserm et l’Université Paris Diderot.

 

Vidéomicroscope Eclipse Ti-S (Nikon)

Crédit : J.PICOT

Le microscope inversé Eclispe Ti-S est équipé d’une caméra monochrome évolution VF MediaCybernetics permettant d’imager en lumière transmise des cellules en culture (platine chauffante) et en fluorescence (DAPI, GFP, Rhodamine) à divers grandissements (2x/0.06 Plan ; 4x/0.13 Plan ; 10x/0.45 DIC Plan ; 20x/0.75 DIC Plan ; 40x/0.75 DIC Plan; 60x/1.4 DIC Plan APO oil ; 100x/1.3 DIC Plan APO oil).

L’imagerie tissulaire après colorations histologiques est également possible grâce à un filtre à cristaux liquide positionné devant la caméra.

Cet instrument a été financé par l’INTS et l’Inserm.

 

BioStation IM (Nikon)

Crédit : J.PICOT

La BioStation IM est un système compact de surveillance des cellules avec incubation qui permet de mener une large gamme d’expériences de time-lapse multi-positionnelle à court ou long terme, notamment pour des études de croissance, de différenciation, de morphologie et d’expression protéique, et ce à divers grandissements (20x, 40x et 80x). Un contrôle environnemental cohérent de la température, de l’humidité et des concentrations en gaz est assuré. L’imagerie en contraste de phase peut être associée à deux fluorescences (GFP / Rhodamine) simultanément.

Cet instrument a été financé par l’INTS et l’Inserm.

 

Station d’analyse et de retraitement des données

Ce poste d’analyse et de retraitement contient les logiciels AxioVision (Zeiss), ImageJ et Adobe Photoshop CS3 permettant de faire de la déconvolution 2D et 3D; de la segmentation; du comptage automatique sur des critères de taille, de forme et d’intensité lumineuse; du tracking d’objets…